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Objetivos: Utilizar varios métodos que permiten la diferenciación
entre Candida albicans y Candida dubliniensis en un intento de
conocer si C. dubliniensis puede ser aislada de la cavidad oral
de adolescentes con prótesis ortopédicas orales.
Materiales y métodos: Se aislaron 12 cepas de género Candida
procedentes de mucosa palatina y de soporte de prótesis de 12
pacientes adolescentes portadores de prótesis ortopédicas orales.
Para la diferenciación entre C. albicans y C. dubliniensis se
utilizaron varias pruebas fenotípicas (la asimilación de fuentes
de carbono con el método comercial ID 32C, el crecimiento en
agar glucosado de Sabouraud a 45 ºC, la producción abundante
de clamidosporas en agar caseína, y la reactividad mediante
inmunofluorescencia indirecta con un antisuero específico
para C. dubliniensis) y la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR). El serotipado de C. albicans se realizó con el anticuerpo
monoclonal B9E.
Resultados: Los 12 pacientes estudiados presentaron una estomatitis
protésica tipo 2 de Newton y en todos los casos se aislaron
las mismas especies de la muestra de mucosa y de la de prótesis
del mismo paciente. El CHROMagar Candida y la prueba de la
filamentación en suero permitieron diferenciar los aislamientos
que daban lugar a colonias de color verde y filamentaban de los
que daban colonias violetas y no lo hacían. Unicamente el aislamiento
del paciente 8 fue positivo con el antisuero específico
para C. dubliniensis y produjo abundantes clamidosporas en agar caseína, mientras que ocho aislamientos no presentaron crecimiento
a 45 ºC. La identificación de todos los aislamientos se
consiguió con la prueba ID 32C, identificándose C. albicans en el
75% de los pacientes, C. glabrata en el 16,6% y C. dubliniensis
en el 8,3%. La PCR con iniciadores específicos para el tipado
de C. dubliniensis permitió la identificación del aislamiento del
paciente 8 como C. dubliniensis genotipo 1.
Conclusión: C. dubliniensis puede ser aislada de la cavidad oral
de adolescentes con estomatitis asociada a prótesis ortopédicas
y es posible, y técnicamente asequible, la diferenciación entre
C. albicans y C. dubliniensis mediante la realización de pruebas
como el ID 32C, la observación de abundantes clamidosporas
en agar caseína, la reactividad con un antisuero específico para
C. dubliniensis y la PCR.Objectives: Test several methods that allow the differentiation
between Candida albicans and Candida dubliniensis, in an attempt
to assess whether C. dubliniensis can be recovered from
the oral cavity of teenagers wearing orthopedic oral prostheses.
Material and Methods: Twelve Candida strains were isolated
from the prosthesis as well as the palatal mucosa in contact
with the dental prosthesis from 12 teenager patients wearing
orthopedic oral prostheses. Differentiation between C. albicans
and C. dubliniensis was achieved by a number of phenotypic
tests (carbon assimilation by the commercially available ID
32C test, growth at 45ºC on Sabouraud glucose agar, abundant
chlamydospore production on Casein agar, and reactivity with
a C. dubliniensis antiserum) and the polymerase chain reaction
(PCR). Serotyping of C. albicans was performed with monoclonal
antibody B9E.
Results: All 12 patients studied presented a Newton's type 2
denture stomatitis and in every patient the same Candida species
were isolated from the prosthesis and the palatal mucosa
in contact with the dental prosthesis. CHROMagar Candida and
the germ tube test allowed the differentiation of isolates giving
green colonies and a positive germ tube test from those giving
violet colonies and a negative germ tube test. Only the isolate
from patient 8 was stained by the C. dubliniensis antiserum and
showed abundant chlamydospore production on Casein agar.
Eight isolates did not grow at 45 ºC. Identification of all isolates
was obtained by the ID 32C test. C. albicans was identified in
75% of patients, C. glabrata in 16,6% and C. dubliniensis in
8,3%. By using specific primers for typing C. dubliniensis, PCR
allowed the identification of patient's 8 isolate as C. dubliniensis
genotype 1.
Conclusion: C. dubliniensis can be isolated from the oral cavity
of teenagers wearing orthopedic oral prostheses and it is possible and technically amenable, the differentiation between C.
albicans y C. dubliniensis using the ID 32C test, the observation
of abundant chlamydospore production on Casein agar, the
reactivity with a C. dubliniensis antiserum and the PCR.
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