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Cuantificación de la calidad embrionaria mediante el consumo de oxígeno durante el proceso rutinario de incubación y desarrollo in vitro

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Cuantificación de la calidad embrionaria mediante el consumo de oxígeno durante el proceso rutinario de incubación y desarrollo in vitro

dc.contributor.advisor	Santos Molina, María José de los
dc.contributor.advisor	Meseguer Escrivá, Marcos
dc.contributor.advisor	Garrido Puchalt, Nicolás
dc.contributor.author	Tejera Pastor, Alberto
dc.contributor.other	Departament de Bioquímica i Biologia Molecular	es_ES
dc.date.accessioned	2015-01-30T12:19:32Z
dc.date.available	2015-07-30T03:45:05Z
dc.date.issued	2015	es_ES
dc.date.submitted	18-02-2015	es_ES
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/10550/41646
dc.description.abstract	Embryo morphology assessment (determined by the number, size, and shape of blastomeres, the proportion of fragments, and the presence of multinucleated cells) is not enough to get a successful pregnancy, and seemingly good embryo morphology does not always lead to implantation and birth. For this reason, several non-invasive tests of culture environment of a developing embryo have been proposed to gain supplementary information regarding embryo viability. One of these noninvasive methods that is consolidating as a good indicator of overall metabolic activity and a valuable parameter for evaluating embryo quality is the oxygen consumption, because is directly related to the capacity of an embryo to produce ATP via oxidative phosphorylation, a process that utilizes 30% and 60–70% of the oxygen consumed by the embryo at the early cleavage and blastocyst stages respectively. The purpose of this thesis is to describe new and potentially useful aspects for the evaluation of the embryo implantation potential, focusing on oxygen consumption as a tentative method for embryo selection. In the first part of this thesis, we focused on oocytes oxygen consumption; evaluating the influence of different stimulation protocols on this uptake as well as the influence of different oocyte dimorphisms in respiration rates. The next step was to study how the fertilization process might be affected by the oxygen uptake. In the second part we focused on embryos, measuring the OC during 3 days of culture until embryo transfer and evaluating its correlation with embryo development and reproductive outcome. Regarding first part we demonstrated that oxygen consumption is affected by ovarian stimulation regimens. According to oxygen consumption and oocyte morphology we checked that the oxygen consumption was not affected by the oocyte morphology. Oocytes with normal morphology had similar consumption compared to other abnormal oocyte phenotypes. Finally the analysis between the oxygen consumption and the fertilization process, showed a direct correlation between oocyte oxygen consumption and normal fertilization (with 10% higher of oxygen consumption rate for oocytes successfully fertilized compared to oocytes that failed to fertilize).	en_US
dc.description.abstract	A pesar de la aplicación intensiva de las TRA y de las cada vez mayores tasas de éxito, hay ciertos aspectos de estos tratamientos que continúan sin resolverse, siendo una limitación importante el hecho de que sólo entre el 10-20% de los embriones transferidos al útero sean capaces de dar lugar a un embarazo a término. Esta limitación está promoviendo el desarrollo de nuevas técnicas no invasivas para seleccionar embriones más eficazmente que mediante el mero criterio morfológico. Las evidencias apoyadas por distintos trabajos encontrados en la literatura hacen que consideremos algunos métodos no invasivos, como la actividad metabólica de ovocitos y embriones, como buenos predictores de la calidad y desarrollo embrionario. El método considerado como el mejor indicador de la actividad metabólica global es el consumo de oxígeno, ya que está directamente relacionado con la capacidad del embrión para producir ATP y como un parámetro importante en la evaluación de la calidad embrionaria. Por ello pretendemos comprobar la utilidad del consumo de oxígeno en los ovocitos y embriones en la mejora de la selección embrionaria, y por tanto, en el éxito reproductivo. El uso de este nuevo marcador proporcionaría un método cuantitativo y objetivo de valoración de calidad ovocitaria y embrionaria, sustituyendo los métodos de clasificación morfológicos subjetivos por un método más fiable y eficaz. Inicialmente en la primera parte de este trabajo hemos comparado si el consumo de oxígeno ovocitario estaba afectado por diferentes aspectos como protocolos de estimulación ovárica, morfología de los ovocitos antes de la microinyección y tasas de fecundación resultante tras la inyección ovocitaria. Se incluyó un total de 395 ovocitos iniciales con análisis en 349 ovocitos maduros.Los resultados obtenidos muestran diferencias en el consumo de oxígeno de los ovocitos dependiendo del protocolo de estimulación ovárica usado, con mayores valores cuando se usan gonadotropinas del tipo recombinante(rFSH). El consumo de oxígeno no mostró correlación alguna con los dimorfismos ovocitarios, no viéndose este consumo afectado según la morfología del ovocito. En cuanto a la parte de la fecundación encontramos mayores valores de consumo de oxígeno en aquellos ovocitos que fecundaron correctamente, demostrándose de forma indirecta unos mayores niveles energéticos(ATP) en aquellos ovocitos con una correcta carga mitocondrial, tal y como se ha publicado en mamíferos no humanos.	es_ES
dc.format.extent	132 p.	es_ES
dc.language.iso	es	es_ES
dc.subject	estimulación ovárica	es_ES
dc.subject	implantación embrionaria	es_ES
dc.subject	citocinesis	es_ES
dc.subject	consumo de oxígeno	es_ES
dc.subject	metabolismo	es_ES
dc.subject	desarrollo embrionario	es_ES
dc.subject	morfología ovocitaria	es_ES
dc.subject	respiración celular	es_ES
dc.subject	fecundación in vitro	es_ES
dc.subject	cytokinesis	es_ES
dc.subject	metabolism	es_ES
dc.subject	oocyte morphology	es_ES
dc.subject	cellular respiration	es_ES
dc.subject	in vitro fertilization	es_ES
dc.title	Cuantificación de la calidad embrionaria mediante el consumo de oxígeno durante el proceso rutinario de incubación y desarrollo in vitro	es_ES
dc.type	doctoral thesis	es_ES
dc.subject.unesco	UNESCO::CIENCIAS MÉDICAS	es_ES
dc.embargo.terms	6 months	es_ES