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Sampedro Sigalat, Carlos
Font Bisier, Enrique (dir.); Desfilis Barceló, Ester (dir.) Departament de Zoología |
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Aquest document és un/a tesi, creat/da en: 2015 | |
Studies conducted mainly in birds and mammals show that adult neurogenesis regulation responds to numerous factors. In reptiles, however, the available information is scarce. The main aim of this thesis is to identify factors that regulate brain size and adult neurogenesis in a reptile, the brown lizard (Podarcis liolepis). In particular, we study how sex, seasonality and steroid hormones affect brain size and the olfactory bulbs, and cell proliferation and migration of new cells in the telencephalon of these lizards. We captured 10 adult males of each sex every two months for a year, we inject tehm a marker of cell proliferation (bromodeoxyuridine, BrdU), and sacrificed them three weeks later. We extracted and weigh the brains and measure the length of the olfactory bulbs. We cut the brain in three series, we perform immunocytochemistry for BrdU in a series, and we counted the BrdU + c...
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Studies conducted mainly in birds and mammals show that adult neurogenesis regulation responds to numerous factors. In reptiles, however, the available information is scarce. The main aim of this thesis is to identify factors that regulate brain size and adult neurogenesis in a reptile, the brown lizard (Podarcis liolepis). In particular, we study how sex, seasonality and steroid hormones affect brain size and the olfactory bulbs, and cell proliferation and migration of new cells in the telencephalon of these lizards. We captured 10 adult males of each sex every two months for a year, we inject tehm a marker of cell proliferation (bromodeoxyuridine, BrdU), and sacrificed them three weeks later. We extracted and weigh the brains and measure the length of the olfactory bulbs. We cut the brain in three series, we perform immunocytochemistry for BrdU in a series, and we counted the BrdU + cells in the telencephalic areas. In the olfactory bulbs we also identify the phenotype of BrdU + cells by immunocytochemistry for double labeling of BrdU and doublecortin. Moreover, we quantified testosterone and corticosterone levels in males and testosterone and estradiol levels in females by ELISA techniques.
Three weeks after BrdU administration, we found many BrdU + cells in the telencephalon of P. liolepis. Most of them (over 60%) were found in the ventricular zone; about 20% in the olfactory bulbs; and the rest in the parenchyma of telencephalic areas. The results showed that sex, seasonality and steroid hormones regulate brain size, the size of the olfactory bulbs and adult neurogenesis in P. liolepis. Adult males have larger brains and olfactory bulbs and produce more cells in the telencephalon than females. The brain and the main olfactory bulbs are larger in spring than the rest of the year. The levels of cell proliferation in the telencephalon are higher in spring and autumn than in winter and summer. The rate of migration of new cells to their destinations does not differ between the sexes, and it is higher in summer than in the rest of the year. In males, testosterone levels increase in spring, and corticosterone increase in summer. The presence of spatial areas and chemosensory which are larger and produce more cells in males of P. liolepis could be related to higher spatial and chemosensory abilities in males than in females, or a greater dependence on these skills in males. Spatial and chemosensory areas produce more cells in spring and autumn, when the dependence of spatial and chemosensory skills is higher in P. liolepis for the exploration of the environment, the detection of prey and predators and in social contexts. Sex and seasonal produce different effects on different stages of adult neurogenesis in P. liolepis (e.g. cell proliferation increases in spring and autumn, while the rate of migration increases in summer). These results highlight the complexity of the regulation of adult neurogenesis in reptiles, and the importance of studying the regulation in various stages of adult neurogenesis (cell proliferation, migration, differentiation and survival of new cells).Estudios llevados a cabo principalmente en aves y mamíferos muestran que la neurogénesis adulta responde a la regulación de numerosos factores. En los reptiles, sin embargo, la información disponible es escasa. El objetivo principal de esta tesis consiste en identificar factores que regulan el tamaño del cerebro y la neurogénesis adulta en un reptil, la lagartija parda (Podarcis liolepis). En particular estudiamos cómo el sexo, la estacionalidad y las hormonas esteroides afectan al tamaño del cerebro y de los bulbos olfativos, y a la proliferación celular y la migración de las nuevas células en el telencéfalo de estos lagartos. Para ello, capturamos 10 machos adultos de cada sexo cada dos meses durante un año, les inyectamos un marcador de proliferación celular (bromodeoxiuridina, BrdU), y los sacrificamos tres semanas después. Extrajimos y pesamos los cerebros, y medimos la longitud de los bulbos olfativos. Cortamos el cerebro en tres series, realizamos inmunocitoquímica para BrdU en una serie, y contamos las células BrdU+ en las áreas telencefálicas. En los bulbos olfativos además identificamos el fenotipo de las células BrdU+ mediante inmunocitoquímica para doble marcaje de BrdU y doblecortina. También cuantificamos los niveles de testosterona y corticosterona en los machos, y los niveles de estradiol y testosterona en las hembras mediante técnicas ELISA.
Los resultados obtenidos mostraron que el sexo, la estacionalidad y las hormonas esteroides regulan el tamaño del cerebro, el tamaño de los bulbos olfativos y la neurogénesis adulta en P. liolepis. Los machos adultos tienen cerebros y bulbos olfativos más grandes y producen más células en el telencéfalo que las hembras. El cerebro y los bulbos olfativos principales son más grandes en primavera que el resto del año. Los niveles de proliferación celular en el telencéfalo son más altos en primavera y otoño que en invierno y verano. La tasa de migración de nuevas células a sus lugares de destino no difiere entre los sexos, y es más alta en verano que en el resto del año. Los niveles de testosterona en los machos aumentan en primavera, y los de corticosterona en verano. La presencia de áreas espaciales y quimiosensoriales más grandes y que producen más células en los machos de P. liolepis podría relacionarse con mayores habilidades espaciales y quimiosensoriales que las hembras, o una mayor dependencia de estas habilidades. Las áreas espaciales y quimiosensoriales producen más células en primavera y otoño, cuando la dependencia de las habilidades espaciales y quimiosensoriales en P. liolepis es más alta para la exploración del entorno, la detección de presas y depredadores y en contextos sociales. El sexo y la estacionalidad producen distintos efectos sobre distintas fases del proceso de neurogénesis adulta en P. liolepis (e.g. los niveles de proliferación aumentan en primavera y otoño, mientras que la tasa de migración aumenta en verano). Estos resultados ponen de manifiesto la complejidad de la regulación de la neurogénesis adulta en los reptiles, y la importancia de estudiar la regulación en distintas fases de la neurogénesis adulta (proliferación, migración, diferenciación y supervivencia de las nuevas células).
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