La metabolómica es un área de investigación emergente y puede ser considerada, a nivel bioquímico, como el final de la cascada “ómica” (genómica → transcriptómica →proteómica → metabolómica) ya que los cambios en el metaboloma constituyen la última respuesta del organismo a alteraciones genéticas, químicas, ambientales, etc. En ese sentido, el metaboloma está muy ligado al fenotipo y puede constituir una herramienta sumamente útil para diagnosticar enfermedades y evaluar el efecto de los tratamientos. Los metabolitos son los productos finales de todos los procesos que se producen en las células, y las concentraciones de metabolitos en los procesos patológicos reflejan la adaptación de los sistemas biológicos a las alteraciones bioquímicas características de cada enfermedad. La firma metabólica de un paciente, generalmente obtenida de forma no-invasiva a partir del análisis de biofluidos, contiene información relacionada con el genotipo, pero también con otros factores como la progresión de la enfermedad o la respuesta a los tratamientos. Esto explica por qué la metabolómica está atrayendo tanto interés para la identificación de biomarcadores de valor diagnóstico y para el seguimiento de pacientes de distintas patologías. En particular, los procesos oncológicos, que implican la desregulación de múltiples vías bioquímicas, son excelentes candidatos para la realización de estudios metabolómicos. La variabilidad en la fisiopatología de la enfermedad, junto con las diferencias individuales en la respuesta a los tratamientos, constituye la base de los esfuerzos por personalizar este tipo de terapias. Para la obtención de información biológica relevante y llevar a cabo con éxito un estudio metabolómico es necesario establecer una metodología experimental adecuada que debe incluir un buen diseño experimental, una adecuada selección y almacenamiento de las muestras, así como una adecuada técnica analítica y un correcto tratamiento e interpretación de los datos. Este estudio se divide en tres partes que intentan abordar los elementos adecuados y necesarios para una correcta aproximación experimental en un estudio de metabolómica enfocado a la búsqueda de nuevos biomarcadores de utilidad clínica. En la primera parte se evalúa la estabilidad de las muestras durante los procesos de la fase preanalítica para así poder identificar posibles biomarcadores de calidad de las muestras. La heterogeneidad de los procedimientos de muestreo y almacenamiento puede introducir una variabilidad significativa en la composición molecular de las muestras biológicas y, en consecuencia, interferir en el resultado experimental o afectar a su reproducibilidad. Tanto el suero como el plasma son biofluidos usados ampliamente como matrices biológicas en la investigación biomédica para identificar biomarcadores clínicamente relevantes. En este contexto es importante conocer la viabilidad de las muestras y las condiciones específicas que son necesarias para el uso de esta tecnología tanto para la investigación como para la práctica clínica diaria. La Resoncia Magnética Nuclear (RMN) de protón (1H-RMN) es una técnica no-invasiva que tiene multitud de aplicaciones en el análisis de sistemas biológicos y puede resultar extremadamente útil. Una de las principales limitaciones en el análisis metabolómico es la ausencia de metodologías estandarizadas que permitan desarrollar estudios en profundidad y fácilmente reproducibles en otros laboratorios. La segunda parte del proyecto analiza las diferentes estrategias y herramientas que se emplean en el análisis de los perfiles metabolómicos. Cómo desde un biofluido, usando como plataforma la 1H-RMN, podemos obtener información global de las señales correspondientes a los perfiles metabolómicos presentes en la muestra (metabolomic fingerprinting), pudiéndose identificar diferencias y/o similitudes entre los individuos a través de un análisis conjunto y multivariante de estas señales. En este contexto, se plantean dos aplicaciones prácticas dirigidas a la búsqueda de nuevos biomarcadores. Por un lado, ser realizó un estudio para evaluar la variabilidad biología y la búsqueda de biomarcadores en muestras de orina de pacientes con Cáncer de Próstata frente a individuos con Hiperplasia Benigna de Próstata. Por otro lado, se realizó un estudio de validación de biomarcadores de suero en pacientes Cáncer de Pulmón No Microcítico (CPNM). En este contexto, tras la realización de un estudio previo en nuestro laboratorio de un conjunto de metabolitos útiles en el diagnóstico precoz de CPNM, se realizó un estudio de validación de dichos metabolitos con un conjunto de muestras independiente.