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Los sistemas CASA permiten el análisis de un gran número de células en muy poco tiempo, además de proporcionar una batería considerable de datos cuantitativos sobre cinética o morfometría de espermatozoides, lo que permite optimizar la cantidad y la confiabilidad de las dosis seminales producidas. Centrándose en la tecnología CASA, para obtener datos cuantitativos confiables, es necesario definir protocolos óptimos para la evaluación de cada parámetro seminal que garantice la consistencia y universalidad de la aplicación de los resultados. Sin embargo, hemos encontrado que este tipo de trabajo de estandarización de los protocolos aún no se ha llevado a cabo de manera integradora, lo que constituye el objetivo general de la presente tesis doctoral. En el primer trabajo (capítulo IV), el enfoque estadístico "clásico", basado en el análisis de varianza, el análisis de componentes principales (PC) mostró que las variables se agruparon en PC1, en relación con el tamaño y la PC2 con la forma. El análisis de la estructura de la subpoblación mostró cuatro grupos, a saber, grandes, pequeños, cortos y estrechos respecto de sus características. El segundo trabajo (capítulo V) mostró que la velocidad de fotogramas (FR) afectaba a todos los parámetros cinemáticos, siendo la velocidad curvilínea (VCL) la más sensible. Para estudios futuros basados únicamente en la motilidad progresiva, se deben usar 100 Hz durante 0,5 s, mientras que cuando se debe considerar la cinemática, se deben analizar a 212 Hz durante un segundo. En el tercer trabajo (capítulo VI), la motilidad total y progresiva no se vio afectada por el tiempo de captura. El tiempo de captura tuvo un efecto significativo en los valores de velocidad e índices (P <0.05). En los estudios basados solo en la motilidad se puede usar medio segundo, mientras que cuando la cinemática debe considerarse se deben analizar dos segundos. El cuarto trabajo (capítulo VII), indicó que el acrónimo de CASA (análisis de semen asistido por computadora) no es informativo ya que el análisis podría referirse a cualquier aspecto de los espermatozoides. Sugerimos la siguiente terminología compuesta por guiones: el uso genérico de CASA para cualquier análisis de semen asistido por computadora con esperma, seguido de una abreviatura que indica el análisis realizado, es decir, CASA-Mot (para motilidad, incluida la cinemática) y CASA-Morph (para morfología, incluida la morfometría). En el quinto trabajo (capítulo VIII), se analizaron nueve posiciones fijas por tipo de cámara, considerando los campos central y lateral y los tres longitudinales. Independientemente del diluyente utilizado, se encontraron diferencias entre las tres cámaras y el interior del capilar cargado. El sexto trabajo (capítulo IX) mostró que todos los parámetros cinemáticos mostraron diferencias significativas entre razas e individuos dentro de cada raza. Al tomar en consideración las células por animal y raza, los análisis discriminantes mostraron una alta capacidad para predecir la fuente de la raza. Finalmente, en nuestro séptimo trabajo (capítulo X), en las muestras de semen de Caiman crocodilus fuscus, la motilidad total y progresiva no se vio afectada (P> 0.05) por el efecto animal. El análisis de componentes principales (PC) mostró que las variables se agruparon en cuatro componentes: PC1, relacionada con la progresividad, PC2 a la velocidad, PC3 a la oscilación y PC4 al tamaño de la cabeza del esperma. Las distribuciones de cada subpoblación de espermatozoides variaron entre los animales que potencialmente representan una relación con la capacidad de fertilización. Este estudio representa el primer trabajo en análisis CASA en espermatozoides de Caimán.
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