NAGIOS: RODERIC FUNCIONANDO

Potencial uso de la tecnología basada en microARNs para el diagnóstico y pronóstico de la escoliosis idiopática del adolescente

Repositori DSpace/Manakin

IMPORTANT: Aquest repositori està en una versió antiga des del 3/12/2023. La nova instal.lació está en https://roderic.uv.es/

Potencial uso de la tecnología basada en microARNs para el diagnóstico y pronóstico de la escoliosis idiopática del adolescente

dc.contributor.advisor	Pérez Machado, Gisselle
dc.contributor.advisor	García Giménez, José Luis
dc.contributor.advisor	Mena Mollá, Salvador
dc.contributor.author	Berenguer Pascual, Ester
dc.contributor.other	Departament de Bioquímica i Biologia Molecular	es_ES
dc.date.accessioned	2022-02-07T09:00:12Z
dc.date.available	2022-03-10T05:45:06Z
dc.date.issued	2021	es_ES
dc.date.submitted	10-02-2022	es_ES
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10550/81499
dc.description.abstract	Introducción: La escoliosis idiopática del adolescente (EIA) es una enfermedad que se caracteriza por una deformación tridimensional de la columna vertebral cuya etiología es aún desconocida. Actualmente no existe una explicación clara sobre la evolución de la enfermedad; El diagnóstico y seguimiento actual de la EIA se basa en el análisis de la curvatura de la columna mediante radiografía de rayos X, la cual está considerada como la técnica gold standard. Sin embargo, esta técnica no tiene valor pronóstico y las repetidas exposiciones han demostrado incrementar la incidencia de cáncer en la edad adulta. Es necesario, por tanto, el desarrollo de una nueva herramienta para el diagnóstico temprano y monitorización de la progresión de la EIA. El papel de los factores genéticos implicados en la EIA está bien documentado, pero más recientemente, se ha hecho hincapié en el papel de la epigenética, la cual también puede contribuir a la etiopatogenia de la EIA. En este contexto, los miARNs, moléculas de señalización epigenética que contribuyen a la morfogénesis ósea y a la osteoclastogénesis, pueden convertirse en nuevos y útiles biomarcadores para el diagnóstico/pronóstico de esta enfermedad. Objetivos: Optimizar la RT-qPCR con el diseño de cebadores y sonda para cada uno de los miARNs en la plataforma LightCycler480II (Roche) y con ellos desarrollar un test In vitro (IVD), ScoliPro®, basado en la detección de una firma de miARNs (hsa-miR-27a, hsa-miR-122-5p, hsa-miR-223-5p y hsa-miR-1306-3p) como biomarcadores de diagnóstico/pronóstico de la EIA. Materiales y Métodos: Para desarrollar el prototipo del test, se diseñan cebadores específicos y sondas Taqman para la medición de la firma de miARNs mediante RT-qPCR en la plataforma LightCycler480II (Roche). Se evalúa la sensibilidad y especificidad analítica utilizando miARNs sintéticos. La monitorización del estudio la realiza la CRO Experior. La capacidad diagnóstica/ pronóstica del prototipo del test se evalúa en muestras de plasma de 52 pacientes con EIA (cohorte de validación del kit) reclutados en el Hospital La Fe (Valencia) y el Hospital Doctor Peset (Valencia). Las variables antropométricas y los niveles de expresión de los miARNs se utilizan para evaluar la capacidad diagnóstica/pronóstica del kit ScoliPro®. La recolección, procesamiento y almacenaje de las muestras de plasma, la validación analítica (sensibilidad y especificidad analítica) así como la validación clínica se realiza aplicando las Buenas prácticas de laboratorio y Buenas prácticas clínicas, respectivamente. Resultados: se optimiza la RT-qPCR en la plataforma LightCycler480II (Roche Life Science) como metodología para la cuantificación de la firma de miARNs como biomarcadores de diagnóstico y pronóstico de la EIA. La expresión de los miARNs miR-122-5p y miR-1306-3p de los pacientes con EIA muestran patrones de expresión diferencial estadísticamente significativos en comparación con los controles. Se observan diferencias significativas de expresión en el miR-1306-3p cuando se compara el grupo de pacientes EIA que evolucionan a escoliosis más severas con el grupo que no progresa, función pronóstica del test ScoliPro®. Conclusiones: La implicación de miR-122-5p y miR-1306-3p en la EIA proporciona una nueva herramienta para el diagnóstico temprano, pronóstico y la variabilidad fenotípica de la EIA lo cual se puede evaluar a través del kit ScoliPro®.	es_ES
dc.format.extent	392 p.	es_ES
dc.language.iso	es	es_ES
dc.subject	escoliosis idiopática del adolescente	es_ES
dc.subject	microARNs	es_ES
dc.subject	RT-qPCR	es_ES
dc.subject	producto sanitario de diagnóstico in vitro	es_ES
dc.title	Potencial uso de la tecnología basada en microARNs para el diagnóstico y pronóstico de la escoliosis idiopática del adolescente	es_ES
dc.type	doctoral thesis	es_ES
dc.subject.unesco	UNESCO::CIENCIAS MÉDICAS	es_ES
dc.embargo.terms	1 month	es_ES